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    磷脂酶A2(PLA2)測試盒可見分光光度法

    簡要描述:磷脂酶A2(PLA2)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:瓊脂培養(yǎng)基S 英文名稱:Agar medium S(R2A) 產(chǎn)品規(guī)格:250g RV肉湯(EP) 英文名稱:Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 鹽瓊脂 英文名稱:Mannitol Salt Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基K(XLD瓊脂) 英文

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-27
    • 訪  問  量:1083

    詳細(xì)介紹

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:磷脂酶A2(PLA2)測試盒可見分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

    檢測方法:可見分光光度法

    產(chǎn)品貨號:BK-01S6660

    產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
    商品介紹:

    測定意義:

    磷脂酶A2EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?;饷?,廣泛存在于動植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細(xì)胞信號傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過程,在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。

    測定原理

    磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。

    自備實驗用品及儀器

    天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實驗方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    1000 U 限制性內(nèi)切PstI Restriction Endonuclease -20℃保存

    100mL Sodium Cacodylate Buffer(二甲胂酸鈉緩沖液),0.1M,pH6.8   Sodium Cacodylate Buffer,0.1M,pH6.8   常溫保存

    1 管 BL21大腸桿菌 BL21 E.coli Strain -80℃保存

    2 ug pQE-Tirs pQE-Tirs 低溫運輸,-20℃保存

    HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB)  5條/盒

    2 ug pcDNA3 YFP pcDNA3 YFP 低溫運輸,-20℃保存

    WORT肉湯 Wort Broth 250g

    2mg 亮抑肽 Leupeptin  -20℃保存

    鹽增菌液(SF) Selenite Enrichment Medium 250g

    5mL 上皮細(xì)胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

    10g ATP Solution(ATP溶液),100mM ATP Solution,100mM 常溫保存

    磷脂酶A2(PLA2)測試盒可見分光光度法Filaggrin  兜甲蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Tyk2(Tyr1054/1055)  磷酸化非受體酪蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    FGF4  纖維母細(xì)胞生因子4抗體 規(guī)格: 0.1mlCD150/SLAMF1  信號淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體 規(guī)格: 0.2ml

    ENPP7  堿性鞘磷脂7抗體 規(guī)格: 0.1mlLCE2B  晚期包膜蛋白2B抗體 規(guī)格: 0.2ml

    SAA4/Serum amyloid A 4 protein  清淀粉樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlPMS2  瘤錯配修復(fù)基因PMS2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    CPA1/Carboxypeptidase A  胰羧肽A1抗體 規(guī)格: 0.1mlRNF56/CBLB  環(huán)指蛋白56 規(guī)格: 0.2ml

    C Peptide  C-肽抗體 規(guī)格: 0.1ml

    EML3  微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Acetyl-p53(K382)  乙?;疨53(Lys382)抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-CDKN2A/P16 (Ser152)  磷酸化抑基因p16抗體 規(guī)格: 0.1ml

    ABCG8  三磷酸苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體 0.2ml

    STAT6  信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml 

     


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