谷丙轉(zhuǎn)氨酶GPT/ALT測(cè)試盒IFCC推薦方法

儀器：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說(shuō)明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書。

測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：

CM-H125人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL二異辛胺(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRDiisooctylamine

ANGPTL7 Others Canine 狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 馬來(lái)酸二甲酯(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRDimethyl maleate

人顱骨成骨細(xì)胞HCO二乙基錫(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,10ng/μl溶于Diethyltin-dichloride

PT67細(xì)胞，小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MCF-7/ER36細(xì)胞 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c草萘胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Napropamid

牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)除蟲脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=3%Diflubenzuron solution
CAL-27(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2水楊酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)Methyl salicylate

HCM-c 人類心肌細(xì)胞 500,000cells 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HPASMC油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99%(GC)Methyl oleate

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系氟芬那酸,氟滅酸質(zhì)量規(guī)格：>99%Flufenamic acid

IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟芬那酸,氟滅酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Flufenamic acid

人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201氟馬西尼/氟馬澤尼質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP31Flumazenil
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 非那雄胺 2-(2-丙醇）酰胺質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Finasteride 2-(2-Methylpropanol)amide

腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6α-羥基非那雄胺質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6α-Hydroxy Finasteride

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 非洲青猴腎細(xì)胞，COS-7細(xì)胞 CBRH-7919(肝癌細(xì)胞)非那雄胺羧酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Finasteride Carboxylic Acid

人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080氟比洛芬Acyl-β-D-葡萄糖苷質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Flurbiprofen Acyl-β-D-glucuronide

TNFRSF10D Others Human 人 AILR4 / TNFRSF10D / DCR2 / CD264 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) O-6-芐基鳥嘌呤，MGMT 的抑制劑質(zhì)量規(guī)格：>98%,MGMT 的抑制劑6-O-Benzylguanine(O6BG)
谷丙轉(zhuǎn)氨酶GPT/ALT測(cè)試盒IFCC推薦方法人胃癌細(xì)胞;MKN-45磺胺嘧啶鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) sulfadiazine(SD-Na)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-氨丁醛縮二乙醇4,4-Diethoxybutylamine質(zhì)量規(guī)格：>97%

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC4-異丙氧基乙氧基酚4-Isopropoxyethoxymethylphenol 質(zhì)量規(guī)格：>97%,液體

F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) AVL292AVL-292質(zhì)量規(guī)格：>98%,高度選擇性的BTK抑制劑

NCI-H520 肺鱗癌5-煙酸5-Methylnicotinic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%

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