綿羊副流感病毒型PCR檢測試劑盒廠家

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應用，并逐步應用于臨床。

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綿羊副流感病毒型PCR檢測試劑盒廠家有絲分裂細胞周期蛋白MPP9抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：MPP9

基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：MMP13

磷酸化生肌決定因子Myf5抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-MYF5 (phospho Ser49)

絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：MAP4K5

E3連接酶MMS21蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：MMS21

雙微體2癌基因抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：MDM2

跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：MS4A2

自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：MAP1LC3A

胃動素抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Motilin

谷氨酸受體2D抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：NR2D

磷酸化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-NRP1(Thr916)

磷酸化膜相關蛋白Numb抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Phospho-Numb (Ser276)

Nemo樣激酶抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Nemo-like kinase

NIPA樣蛋白3抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：NIPAL3

中性粒細胞彈性蛋白酶ELANE抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Neutrophil Elastase