南非諾卡菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環(huán)擴增，擴增產物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

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南非諾卡菌PCR檢測試劑盒規(guī)格APC標記的兔抗人IgG 0.1mlRabbit Anti-human IgG/APC

Alexa Fluor 488標記的兔抗猴IgG 0.1mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 488

Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488

堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗水貂IgG 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/AP

PE-Cy7標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1mlMouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy7

植物14-3-3蛋白抗原 0.5mg14-3-3 family protein(Malus domestica (Apple) (Malus sylvestris))

半胱胺酸蛋白酶蛋白-13（抗原） 0.5mgCaspase-13

血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原 0.5mgANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1)

神經生長因子-β(多肽片斷抗原) 0.5mgNGF- Beta

蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位（抗原） 0.5mgPP-2B alpha 1

CREB結合蛋白抗原 0.5mgCBP(CREB-binding protein)

c-erbB-4癌基因抗原 0.5mgC-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4)

防御素β1抗原 0.5mgDefensin Beta1

FoxP1（T細胞轉錄因子）抗原 0.5mgFoxP1(Forkhead box P1)

標簽DYKDDDDK Tag分支肽 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag