馬隱秘桿菌PCR檢測試劑盒說明書

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術原理：
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
       發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

美利曲辛 CAS  *  規格： 100mg

富馬酸喹平 CAS 111974-72-2 *  規格： 100mg

絡石藤 CAS  *  規格： 1g

赤脛散 CAS  *  規格： 0.2g

右旋糖酐分子量D2 CAS  *  規格： 0.2g/支

蓮子心 CAS  *  規格： 3g

廣藿香油 CAS 2233340 *  規格： 1ml

青 CAS  *  規格： 100mg

*二化物 CAS 64806-05-9 *  規格： 50mg

芍藥苷 CAS 23180-57-6 *  規格： 20mg

當藥苷 CAS 14215-86-2 *  規格： 20mg

* CAS 86189-69-7 *  規格： 100mg

五靈脂 CAS  *  規格： 1g

5-｛4-［2-（5-乙基-2-基） CAS  *  規格： 50mg

銀杏內酯B CAS 15291-77-7 *  規格： 20mg

馬隱秘桿菌PCR檢測試劑盒說明書性  Acid black B  731.71分子量： C36H23N5Na2O6S2*：3071-73-6

性紅3B  Acid red 3B  872.8271分子量： C40H34N4Na2O12*：6459-69-4

1-(甲酰甲)氯吡  172.61  1- (Xian Jiaji An Jijia)*：41220-29-5分子量： C7H9ClN2O

1-BOC-3-  210.27  1-BOC-3- cyano piperidine*：91419-53-3分子量： C11H18N2O2

*  Fu Xiting  309.33分子量： C17H18F3NO*：54910-89-3

(S)-1-Boc-3-氨甲  214.3  (S) -1-Boc-3- ammonia methyl piperidine*：140645-24-5分子量： C11H22N2O2

1-甲-4-乙氧羰-5-磺吡唑  233.24  1- methyl -4- ethoxycarbonyl -5- pyrazole sulfonamide*：分子量： C7H11O4N3S

六氯錸(IV)酸鉀  477.12  Hexachloro rhenium (IV) acid potassium*：16940-97-9分子量： Cl6K2Re

1-芐氧-3-  310.13  1- benzyloxyl iodobenzene -3-*：107623-21-2分子量： C13H11IO

肉蓯蓉苷A  Boschnaloside A  分子量：*：14-1001

β-倒捻子素  Beta a-mangostin  424.4902分子量：C25H28O6*：20931-37-7