PCR檢測試劑盒的檢驗方法介紹

　　PCR檢測試劑盒檢驗方法：

　　1.試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

　　（1）從冰箱中取出試劑盒,從試劑盒中取出實驗所需試劑，充分融化混勻并瞬時離心以去除管壁附著液體。

　　（2）核算當(dāng)次實驗所需要的反應(yīng)數(shù)（n），并根據(jù)如下表所示反應(yīng)體系計算當(dāng)次實驗所需要的各種試劑量。

　　（3）在無菌離心管中加入上述試劑，充分混勻后瞬時離心。按照20μL/管分裝量將試劑分裝至PCR反應(yīng)管。

　　2.樣本準(zhǔn)備（樣本處理區(qū)）

　　用QIAGEN、Roche公司RNA提取試劑盒提取RNA，具體操作按照其試劑盒說明書操作。

　　3.加樣

　　在上述制備好的PCR反應(yīng)樣本管中分別加入處理好的待測標(biāo)本RNA各5μL、終體積25μL/管，蓋好PCR反應(yīng)蓋混勻后瞬時低速離心，轉(zhuǎn)移到PCR儀器上。陰性對照和陽性對照管則各加5μL試劑盒自帶的陰性對照或陽性對照品，終體積為25μL/管，蓋好PCR反應(yīng)蓋混勻后瞬時低速離心，轉(zhuǎn)移到PCR儀器上。

　　4.PCR（PCR擴增區(qū)）

　　取樣本處理區(qū)準(zhǔn)備好的PCR反應(yīng)管，放置在實時熒光定量PCR儀樣品槽相應(yīng)位置，并記錄放置順序。

　　以上就是PCR檢測試劑盒的檢驗方法，希望能對您有所幫助