豬白介素elisa試劑盒的實驗原理和注意事項

　　豬白介素elisa試劑盒具有穩(wěn)定的重復(fù)性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿組織勻漿等多種樣本類型的檢測，方法簡單，操作方便，節(jié)省了實驗經(jīng)費。

　　實驗原理

　　用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測豬白介素elisa試劑盒都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線，如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

　　注意事項

　　1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

　　2. 洗滌過程很重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

　　3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用加樣。

　　4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，建議做復(fù)孔。

　　5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量高，請先稀釋后再測定，計算時請后面乘以稀釋倍數(shù)。

　　6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

　　7. 底物請避光保存。

　　8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。